FUT8 细胞系明胶酶谱试剂盒操作注意事项

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　　1.制备聚丙烯酰胺时应注意排除气泡。
　　2.明胶酶谱的活性受钙离子，锌离子，和PH值等因素的影响，因此缓冲液配制应严格准确，尽量用超纯水，孵育温度也掌握好。
　　3.用大梳子
　　4.孵育液的PH在7.5-7.6，复性的TRITON时间长了会有絮状物，所以实验时尽量使用新鲜配置的。
　　5.孵育的37度不要在CO2培养箱中，因为会改变孵育液的PH值，在普通孵箱即可。
　　6、组织或者细胞的话可以用PBS，可以用低渗溶液如三分之一或者四分之一的生理盐水按照5倍体积加入后震荡裂解细胞，离心即可，步骤和提蛋白很相似即可，其实重点的步骤主要是采用低渗裂解液进行裂解，组织的话可以匀浆20-30次，然后10000转左右离心，5分钟取上清即可